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怎么依據說明書判斷ELISA檢測試劑盒的實驗結果是否有效?

日期:2025-11-03 15:36:52

    判斷ELISA結果是否有效,需嚴格依據說明書中質控品要求、標準曲線參數、重復性指標這三類核心標準逐一驗證。
 
1.質控品(對照)結果需符合要求
    陽性對照(PC):需出現預期的特異性信號(如吸光度值),且達到說明書規定的閾值,證明實驗體系中抗原抗體結合有效。
    陰性對照(NC):信號需低于說明書設定的cutoff值,無明顯非特異性反應,說明實驗無交叉污染或背景干擾。
    空白對照:僅含試劑不含樣本,信號需接近基線水平,排除試劑本身的背景干擾。
 
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2.標準曲線需滿足參數要求
    相關性(R²):說明書通常要求R²≥0.98或0.99,表明標準品濃度與檢測信號的線性關系良好,可用于定量計算。
    回收率/偏差:標準曲線各濃度點的實測值與理論值的偏差需在說明書允許范圍(如±10%~15%)內,保證定量準確性。
    斜率/截距:需符合說明書給出的參考范圍,偏離過大可能提示試劑失效或操作誤差。
 
3.重復性指標需達標
    同一樣本的平行孔(復孔)檢測結果,變異系數(CV值)需低于說明書規定值(通常≤10%~15%),證明實驗操作穩定、結果可重復。