標準ELISA檢測試劑盒通常配備哪些必需的試劑組分?
日期:2025-10-31 15:38:45
標準ELISA檢測試劑盒的必需試劑組分主要圍繞抗原抗體反應、信號放大和結果讀取三個核心環節,具體可分為五大類。
1.特異性結合試劑
這類試劑是ELISA檢測的核心,決定了檢測的特異性。
包被抗體/抗原:已預先包被在酶標板上,或單獨提供需自行包被,用于捕獲樣本中的目標分析物(抗原或抗體)。
檢測抗體:通常為針對目標分析物的另一特異性抗體,部分試劑盒會直接提供酶標記的檢測抗體(酶標二抗)。
酶標記物:若檢測抗體未標記,會單獨提供酶標記的二抗(如HRP、AP標記),用于結合檢測抗體并放大信號。
2.底物與終止液
這類試劑用于將酶的活性轉化為可檢測的視覺或光學信號。
底物溶液:與酶標記物中的酶發生特異性反應,產生顏色變化(如HRP常用TMB底物)、熒光或化學發光信號。
終止液:用于終止底物與酶的反應,固定信號強度,確保檢測結果穩定(如HRP體系常用硫酸終止液)。
3.樣本與標準品
這類試劑用于定量或定性判斷樣本中目標分析物的含量。
標準品:已知濃度的目標分析物,用于制作標準曲線,推算樣本中分析物的濃度。
樣本稀釋液:用于稀釋樣本,使其濃度落在標準曲線的檢測范圍內,同時避免樣本基質對反應的干擾。

4.洗滌與封閉試劑
這類試劑用于減少非特異性結合,降低實驗背景信號。
洗滌緩沖液(PBST/TBST):含有吐溫等表面活性劑,用于清洗酶標板,去除未結合的游離試劑。
封閉液:通常為BSA、脫脂奶等蛋白溶液,用于封閉酶標板上未結合抗體/抗原的空白位點,減少非特異性吸附。
5.輔助工具
部分試劑盒會配套提供實驗必需的耗材,方便直接使用。
酶標板:預包被好抗體/抗原的96孔或384孔板,是反應的載體。
說明書:詳細標注各試劑的使用方法、反應條件、注意事項及結果計算方式,是實驗操作的核心依據。






