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常見的ELISA檢測試劑盒主要有哪幾種類型?

日期:2025-10-16 13:29:01

    常見的ELISA檢測試劑盒主要依據抗原與抗體的結合方式、酶標記對象及檢測目的,分為以下4種核心類型,不同類型在原理和應用場景上存在明確差異:
1.雙抗體夾心法ELISA試劑盒
    這是目前檢測大分子抗原(如蛋白、細胞因子、激素)最常用的類型,原理是用兩種特異性抗體“夾捕”目標抗原:先將未標記的“捕獲抗體”包被在酶標板上,加入樣本后,抗原與捕獲抗體結合;再加入酶標記的“檢測抗體”,形成“捕獲抗體-抗原-酶標檢測抗體”的三明治復合物;最后通過酶促底物顯色,信號強度與抗原濃度正相關。該類型特異性高、靈敏度強,適用于定量檢測,且無需純化抗原(僅需兩種特異性抗體)。
 
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2.間接法ELISA試劑盒
    主要用于檢測樣本中的抗體(如血清中的病原體抗體、自身抗體),原理是先將抗原包被在酶標板上,加入樣本后,樣本中的目標抗體與抗原結合;再加入酶標記的“二抗”(針對目標抗體的抗體,如抗人IgG);最終通過底物顯色反映樣本中目標抗體的含量。該類型優勢是“一抗通用”(只需一種抗原),但易受樣本中非特異性抗體干擾,需設置嚴格對照。
 
3.競爭法ELISA試劑盒
    適用于檢測小分子抗原(如激素、藥物、農藥殘留)或半抗原(無法同時結合兩種抗體的物質),原理是讓“樣本中的目標抗原”與“酶標記的已知抗原”競爭結合包被在酶標板上的特異性抗體:樣本中目標抗原濃度越高,與抗體結合的酶標抗原就越少,底物顯色強度就越弱,最終通過“顯色強度與標準品濃度的反比關系”推算樣本中抗原含量。該類型特異性依賴抗體的專一性,且線性范圍較窄,需精準控制反應條件。
 
4.直接法ELISA試劑盒
    是最簡單的類型,原理是將抗原直接包被在酶標板上,加入“酶標記的特異性抗體”(無需二抗),抗體與抗原結合后,酶催化底物顯色。該類型操作步驟少、耗時短,但缺點明顯:一是酶標記可能影響抗體活性,二是信號強度較弱(無二抗放大效應),三是無法檢測樣本中的抗體(僅適用于抗原檢測),目前在科研和臨床中應用較少,多被雙抗體夾心法或間接法替代。
    不同類型的ELISA試劑盒需根據檢測目標(抗原/抗體、分子大小)、樣本類型(血清/細胞上清)及精度需求選擇,例如檢測人IL-6(大分子細胞因子)常用雙抗體夾心法,檢測乙肝表面抗體常用間接法,檢測血液中藥物濃度常用競爭法。