elisa試劑盒各試劑作用區(qū)別
日期：2023-09-25 15:35:47
ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）是常用的生物學(xué)實驗技術(shù)，用于檢測和定量分析特定抗原或抗體的存在。ELISA試劑盒通常包含以下主要試劑：
1、涂布抗原
? 涂布抗原是一種包含目標(biāo)抗原的溶液或片段。它負責(zé)在固相載體上固定目標(biāo)抗原，使其與待測樣品中的特異性抗體發(fā)生結(jié)合反應(yīng)。
2、樣品/標(biāo)準
? 樣品是待測的生物樣本，可以是血清、血漿、組織提取物等。而標(biāo)準則是已知濃度的目標(biāo)抗原。
? 它們用于檢測和量化目標(biāo)抗原的存在和水平，與涂布抗原進行結(jié)合反應(yīng)。
3、初級抗體
? 初級抗體是針對目標(biāo)抗原的特異性抗體。它與樣品中的目標(biāo)抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物。
? 初級抗體通常與輔助設(shè)備（如酶、熒光標(biāo)記或生物素）結(jié)合，以便在后續(xù)步驟中檢測和定量。
4、洗滌緩沖液
? 洗滌緩沖液用于清洗試驗孔，去除未結(jié)合的物質(zhì)（如非特異性結(jié)合物）。
? 它可以包含適當(dāng)?shù)柠}、洗滌劑和緩沖劑，以保持試驗環(huán)境的穩(wěn)定。
5、二級抗體
? 二級抗體是與初級抗體結(jié)合并攜帶標(biāo)記（如酶、熒光或生物素）的抗體。
? 它與初級抗體結(jié)合免疫復(fù)合物，進一步增強信號產(chǎn)生和檢測效果。
6、底物
? 底物是一種通過酶促反應(yīng)觸發(fā)可見信號的化學(xué)物質(zhì)。常見的底物包括酶標(biāo)記的底物（如TMB、ABTS等）和熒光底物。
? 底物與酶結(jié)合時會發(fā)生顏色變化或熒光發(fā)射，用于定量或檢測信號。
7、停止液
? 停止液是一種改變反應(yīng)pH值的溶液，用于停止底物反應(yīng)，阻止進一步的信號產(chǎn)生。
它通常加入后會使顏色或熒光信號停止變化，并穩(wěn)定所測得的信號。
? ELISA試劑盒中的每個試劑在特定步驟中起到關(guān)鍵作用，用于實現(xiàn)抗原-抗體反應(yīng)、清洗、信號生成和停止等過程，最終得到可靠的結(jié)果。具體的試劑和使用方法可能會因供應(yīng)商和實驗?zāi)康亩兴煌?，因此在進行實驗時應(yīng)仔細閱讀和遵循試劑盒說明書的操作指南。
