elisa檢測(cè)抗體效價(jià)的步驟
日期：2023-08-03 13:19:14
ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）是一種常用于測(cè)定抗體效價(jià)的方法之一。下面是一般 ELISA 檢測(cè)抗體效價(jià)的步驟：
涂覆抗原：將特定的抗原溶液均勻地涂覆在固相載體（如微孔板）表面，使其吸附在載體上。這個(gè)抗原可以是目標(biāo)抗原或?qū)?yīng)的人工合成肽段。
孵育樣品：加入待測(cè)的抗體樣品（如血清）到涂覆好的載體上，讓待測(cè)的抗體與抗原結(jié)合。
洗滌：通過(guò)洗滌去除非特異性結(jié)合的物質(zhì)。
加入二抗：加入與待測(cè)抗體物種來(lái)源不同的標(biāo)記二抗，該二抗能夠識(shí)別和結(jié)合待測(cè)抗體的Fc片段。
洗滌：再次通過(guò)洗滌去除未結(jié)合的二抗。
加入底物：加入底物（如某些底物酶的底物），底物能夠與標(biāo)記二抗上的酶發(fā)生反應(yīng)并產(chǎn)生可測(cè)量的信號(hào)。
反應(yīng)終止：通過(guò)加入適當(dāng)?shù)脑噭┩Ｖ沟孜锏姆磻?yīng)。
讀取結(jié)果：使用光譜儀或酶標(biāo)儀等設(shè)備測(cè)量底物反應(yīng)產(chǎn)生的光吸光度或熒光強(qiáng)度，這個(gè)信號(hào)與抗體效價(jià)相關(guān)。
通過(guò)檢測(cè)不同稀釋倍數(shù)的待測(cè)抗體樣品，可以確定抗體效價(jià)。一般而言，抗體效價(jià)是通過(guò)對(duì)比待測(cè)樣品與已知效價(jià)的陽(yáng)性對(duì)照進(jìn)行計(jì)算和比較得出的。
具體的 ELISA 檢測(cè)步驟和試劑盒的使用方法可能會(huì)有所不同，因此在實(shí)際操作中還需要參考相應(yīng)的試劑盒說(shuō)明書。
