針對膜蛋白、融合蛋白、有毒性蛋白這類特殊蛋白，抗體公司是否有成熟的表達(dá)純化解決方案？
日期：2025-09-30 09:30:37
針對膜蛋白、融合蛋白、有毒性蛋白這類特殊蛋白，主流抗體公司已搭建起成熟的表達(dá)純化技術(shù)體系，通過定制化系統(tǒng)選擇、工藝優(yōu)化及專用平臺開發(fā)，可有效解決其表達(dá)難、純化效率低、活性保留難等核心痛點，具體解決方案如下：
1、膜蛋白：多技術(shù)平臺破解構(gòu)象不穩(wěn)定難題
膜蛋白因跨膜結(jié)構(gòu)導(dǎo)致的疏水性強、易聚集、需特定膜環(huán)境維持構(gòu)象等問題，抗體公司主要通過“表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)化+專用復(fù)性/穩(wěn)定技術(shù)”突破瓶頸。賽默飛世爾科技采用Expi293哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)，利用懸浮293細(xì)胞的天然翻譯后修飾能力，搭配優(yōu)化的培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)染試劑，可實現(xiàn)膜蛋白的原生折疊，同時通過密碼子優(yōu)化（GeneArt技術(shù)）去除基因序列中的抑制元件，提升表達(dá)量。義翹神州則搭建了VLP（病毒樣顆粒）、Detergent（去污劑）和Nanodisc（納米圓盤）三大技術(shù)平臺，例如通過VLP模擬膜蛋白的天然膜環(huán)境，成功生產(chǎn)出4次跨膜的Claudins蛋白和7次跨膜的GPCRs蛋白，且蛋白活性可滿足免疫、SPR等多場景應(yīng)用。巴傲得生物同樣基于HEK293細(xì)胞構(gòu)建VLP平臺，其表達(dá)的膜蛋白因更接近天然構(gòu)象，在藥物研發(fā)相關(guān)檢測中表現(xiàn)出優(yōu)異的活性。
2、融合蛋白：標(biāo)簽與系統(tǒng)組合實現(xiàn)高效純化
融合蛋白的核心需求是平衡“融合標(biāo)簽的輔助功能”與“目標(biāo)蛋白的活性保留”，抗體公司通過靈活的載體設(shè)計和純化工藝組合提供解決方案。德泰生物可根據(jù)融合蛋白的結(jié)構(gòu)特點，篩選高效融合載體與表達(dá)細(xì)胞，選擇胞內(nèi)或分泌表達(dá)模式，例如針對需快速純化的融合蛋白，采用帶His、GST等標(biāo)簽的載體，結(jié)合AKTA蛋白純化系統(tǒng)實現(xiàn)純度＞95%的純化效果；若客戶需無標(biāo)簽的融合蛋白，可通過優(yōu)化純化條件去除標(biāo)簽，同時保證蛋白活性，曾成功解決聚體融合蛋白（四聚體活性結(jié)構(gòu)）的低表達(dá)問題，通過載體和轉(zhuǎn)染方法優(yōu)化提升表達(dá)量并實現(xiàn)活性結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定制備。巴傲得生物則提供多種標(biāo)簽選擇（如His、MBP等），搭配原核、昆蟲或哺乳動物等不同表達(dá)系統(tǒng)，例如原核系統(tǒng)用于小分子融合蛋白的低成本表達(dá)，哺乳動物系統(tǒng)用于需復(fù)雜修飾的融合蛋白生產(chǎn)，同時提供標(biāo)簽去除、內(nèi)毒素去除等附加服務(wù)。
3、有毒性蛋白：低毒性誘導(dǎo)與分泌表達(dá)控制風(fēng)險
有毒性蛋白因?qū)λ拗骷?xì)胞具有殺傷作用，需通過“低劑量誘導(dǎo)表達(dá)”“分泌表達(dá)隔離”等策略控制毒性影響，抗體公司已形成成熟的風(fēng)險控制與生產(chǎn)流程。德泰生物在毒性蛋白表達(dá)中，會優(yōu)化誘導(dǎo)條件（如調(diào)整IPTG濃度、降低培養(yǎng)溫度），同時選擇合適的宿主菌株，避免毒性蛋白對細(xì)胞的過度損傷，其一站式服務(wù)可覆蓋從基因合成到蛋白純化的全流程，曾成功制備多種高毒性病毒抗原，且純化產(chǎn)物可直接用于抗體制備和診斷試劑研發(fā)。賽默飛世爾科技則通過誘導(dǎo)型表達(dá)系統(tǒng)（如含四環(huán)素調(diào)控元件的pcDNA5/TO載體），實現(xiàn)毒性蛋白的可控表達(dá)，只有在誘導(dǎo)劑存在時才啟動蛋白合成，減少對宿主細(xì)胞的基礎(chǔ)毒性；同時利用分泌表達(dá)載體將毒性蛋白分泌至細(xì)胞外，降低胞內(nèi)積累導(dǎo)致的細(xì)胞死亡，提升產(chǎn)量。
此外，多家抗體公司還提供定制化服務(wù)以應(yīng)對特殊需求，例如義翹神州可實現(xiàn)1mL至1500L規(guī)模的靈活培養(yǎng)，最快3周交付純化蛋白；德泰生物承諾“不成功不收費”，并可提供內(nèi)毒素去除、RNA酶去除等附加服務(wù)，這些服務(wù)進(jìn)一步提升了特殊蛋白表達(dá)純化的成功率和適用性。
