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蛋白質純度測定方法

日期:2023-09-14 15:08:00


    蛋白質純度是指一個蛋白質樣品中所含該蛋白質的比例,通常用于評價蛋白質制備和純化的質量。以下是幾種常用的蛋白質純度測定方法:

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1、SDS-PAGE凝膠電泳分析:
    SDS-PAGE凝膠電泳分析是一種常用的分離蛋白質的方法,并可用于測定蛋白質純度。該方法將蛋白質經SDS和還原劑處理后,按照電荷和分子量大小通過聚丙烯酰胺凝膠進行分離。通過與分子量標記物進行比較,可以確定樣品中目標蛋白質的相對分子量和純度。
 
2、比濁度測定法:
    在一定條件下,蛋白質溶液中的蛋白質分子可形成復合物而散射光線,這使得蛋白質溶液的比濁度增大,通過比濁度值可定量測定蛋白質濃度。然而,比濁度法不僅對樣品的純度要求極高,而且因為比濁度技術無法對樣品中不同蛋白質進行區(qū)分,所以在測定混合物的純度時應格外謹慎。
 
3、免疫印跡法:
    該方法是一種將蛋白質特異性結合于固相載體的隨后通過抗體探針定量檢測的方法,可用于檢測目標蛋白質的存在和純度。通過對待測樣品和標準品進行比較,可以定量檢測不同樣品中目標蛋白質含量的差異。該方法適用于大多數蛋白質樣品,通常與其他蛋白質純化方法結合使用,如柱層析、離子交換層析等。
 
    在選擇蛋白質純度測定方法時,應根據實驗需求、樣品類型和儀器設備等因素綜合考慮。此外,不同方法的優(yōu)缺點也應加以比較,以確保結果的準確性和可靠性。