重組抗體表達載體構(gòu)建方法
日期：2023-10-18 16:31:20
重組抗體表達載體的構(gòu)建方法可以分為以下幾個步驟：
基因克隆：將需要表達的靶向抗體的輕鏈和重鏈的基因從目標細胞中分離出來，或通過合成化學方法獲得。
插入載體：將輕鏈和重鏈的基因分別插入到表達載體中，常見的載體包括質(zhì)粒、病毒、細胞質(zhì)體等。
轉(zhuǎn)染表達：將載有抗體基因的載體導入到宿主細胞中，常用的轉(zhuǎn)染方法包括質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、病毒感染等。
誘導表達：通過添加適當?shù)恼T導劑，啟動抗體基因在宿主細胞中的表達，通常使用培養(yǎng)基或小分子化合物作為誘導劑。
純化抗體：用合適的純化方法純化從宿主細胞中表達的抗體，例如親和層析、尺寸排除層析、離子交換層析等技術。
驗證功能：確定表達的抗體是否具有靶向特異性和生物活性。這可能包括ELISA、Western blot、流式細胞術等多種方法。
通過這些步驟，可以構(gòu)建出高效表達、純化和活性驗證的重組抗體載體。
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