雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的主要過程
日期：2023-09-21 13:14:07
制備單克隆抗體的主要過程是通過雜交瘤技術(shù)實(shí)現(xiàn)的。以下是其主要步驟：
免疫原注射：將目標(biāo)抗原注射到小鼠等動(dòng)物的體內(nèi)，激活其免疫系統(tǒng)產(chǎn)生特異性抗體。
細(xì)胞融合：提取免疫動(dòng)物的B細(xì)胞（產(chǎn)生抗體的細(xì)胞）和骨髓瘤細(xì)胞（不斷分裂的癌細(xì)胞），進(jìn)行細(xì)胞融合。
雜交瘤篩選：將融合細(xì)胞培養(yǎng)在含有選擇性培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，使只有雜交瘤能夠存活，而其他細(xì)胞死亡。
篩選單克隆細(xì)胞：通過稀釋法將雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行分離培養(yǎng)，使每個(gè)細(xì)胞單獨(dú)分裂形成單個(gè)細(xì)胞克隆，最終獲得單克隆細(xì)胞。
驗(yàn)證單克隆性：對(duì)每個(gè)單克隆細(xì)胞進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）等方法驗(yàn)證其產(chǎn)生的抗體特異性和單一性。
擴(kuò)大培養(yǎng)：將驗(yàn)證為單克隆的細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，以大量產(chǎn)生抗體。
純化抗體：通過柱層析等方法對(duì)培養(yǎng)上清液進(jìn)行純化，獲得單克隆抗體。
制備單克隆抗體的過程中，雜交瘤技術(shù)的關(guān)鍵在于融合免疫動(dòng)物的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)長期穩(wěn)定地大量產(chǎn)生特異性抗體的單克隆細(xì)胞。這種技術(shù)的應(yīng)用廣泛，可以用于生物醫(yī)學(xué)研究、藥物研發(fā)、疾病診斷等領(lǐng)域。
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